聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR)可在體外把少量目標 DNA 擴增。反應需要模板 DNA、引物、游離核苷酸、耐熱 DNA 聚合酶及合適的反應條件。
第一步:變性 Denaturation
反應混合物被加熱,破壞兩條 DNA 鏈之間的氫鍵,使雙股 DNA 分開成兩條單鏈,為複製提供模板。
第二步:引物退火 Annealing
溫度降低後,短引物會與模板 DNA 上互補的鹼基序列結合。引物決定需要擴增的 DNA 區段,亦為 DNA 聚合酶提供起始位置。
第三步:延伸 Extension
耐熱 DNA 聚合酶由引物開始,按互補鹼基配對加入游離核苷酸,合成新的 DNA 鏈。重複變性、退火及延伸的溫度循環後,目標 DNA 數量會迅速增加。
總結與 DSE 備考啟示
回答 PCR 題目時,要把每個溫度變化連到相應作用:高溫分開 DNA 鏈、降溫讓引物結合,再由耐熱聚合酶延伸。不要把 PCR 與細胞內的自然 DNA 複製混為一談。




